La souche naturelle Bacillus subtilis ATCC 6633 produit un large eventail d'antibiotiques et de biosurfactants. Parmi ces familles de composes, certaines sont synthetisees par une voie originale et non ribosomique: les surfactines et les mycosubtilines. Dans ce travail, l'etude de l'activite biologique des mycosubtilines a d'abord confirme l'etendue du spectre d'action antifongique puis revele celui prometteur de certaines isoformes. Une etude des parametres environnementaux a ensuite permis d'identifier les conditions de culture permettant d'orienter le metabolisme cellulaire vers la biosynthese de l'isoforme la plus active. Plusieurs genes impliques dans des voies metaboliques centrales (ybgE, leuS, bfmBAA, ilvBNCleuABCD) ainsi que des genes codant pour les regulateurs de ces voies ont ete reveles en transcriptomique. La productivite de la biosynthese a finalement pu etre amelioree en combinant l'utilisation d'un derive d'ATCC 6633 surproducteur de mycosubtiline avec la mise au point d'un mode de culture debordant en bioreacteur. Des applications visant les industries des biopesticides ou de la cosmetique sont envisageables dans un futur proche."