La NAD(P)H umana chinone ossidoreduttasi-1 (hNQO1) è un importante biomarcatore legato al cancro, che mostra una significativa sovraespressione nelle cellule maligne. Lo sviluppo di un metodo efficace per rilevare l'attività di NQO1 con alta sensibilità e selettività nei tumori ha un grande potenziale per la diagnosi, il trattamento e la gestione del cancro. Nel presente studio, riportiamo una nuova sonda fluorescente basata sul dicianoisophorone (DCP) (NQ-DCP) in grado di monitorare l'attività di hNQO1 in vitro e in vivo sia nel modello raziometrico che in quello turn-on. L'NQ-DCP è stato preparato coniugando il fluoroprobe dicanoisophorone con l'acido chinone propionico attivabile hNQO1 (QPA), che rimane non fluorescente fino all'attivazione da parte del tumore specifico hNQO1. L'NQ-DCP presenta un grande spostamento di Stokes (145 nm), un'eccellente biocompatibilità, permeabilità cellulare e selettività verso hNQO1 che permette di differenziare le cellule tumorali dalle cellule sane. Abbiamo impiegato con successo l'NQ-DCP per monitorare in modo non invasivo l'attività endogena di hNQO1 nelle cellule tumorali del cervello in vitro e nei tumori xenotrapiantati sviluppati nei topi nudi.