Resume: 26 souches d'actinomycetes ont ete isolees a partir d'echantillons de sol et d'ecorces d'arbres preleves d'ecosystemes differents (sol de champ a Sousse, sol de sable avec vegetation et sol de dune a Douz). Leur identification a ete realisee en se basant sur leurs caracteres macroscopiques et microscopiques. L'activite antimicrobienne a ete effectuee contre deux bacteries a Gram positives et trois bacteries a Gram negatives. Elle a ete realisee par trois techniques qui se basent sur le principe de diffusion qui sont la technique du cylindre d'agar, la technique des disques et la technique des puits. Parmi les 26 souches isolees, 21 souches (80.64%) ont montre une activite contre au moins une bacterie-test etudiee dont 38% ont presente un fort effet antibacterien. Ces derniers ont comme cible majoritaire les bacteries a Gram positives."