Cette thèse décrit la caractérisation physico-chimique et les applications électroanalytiques de nouveaux matériaux nanocomposites, déposés sur des surfaces d¿électrode par autoassemblage électrostatique de polyélectrolytes (PE), d¿enzymes et de nanoparticules d¿or (NP). La croissance de ces films multicouches fut suivie in situ par spectroscopie et microgravimétrie. L¿électrochimie a permis de quantifier le processus de transfert d¿électron, la perméabilité des films et la cinétique électroenzymatique. Des relations structure-propriétés furent établies par modélisation cinétique et structurale. La glucose oxydase et la polyphénol oxydase furent assemblées sur des électrodes d¿or et de carbone vitreux avec le polydiallyldimethylammonium et le chitosane. L¿assemblage de NP et de PE redox, à base de complexe d¿osmium ou de viologène, conduit à des films nanocomposites dont les propriétés de conduction électronique furent caractérisées et appliquées au développement de transducteurs.