Les infections nosocomiales ont un impact majeur de sante publique. La prevalence de ces infections, principalement d'origines bacteriennes, varie de 7% a 15% selon les pays, les unites de soins intensifs etant les services les plus touches. Le developpement des infections nosocomiales s'accompagne de morbi-mortalites importantes ainsi que des surcouts hospitaliers estimes a 7 milliards d'euros par an en Europe. Ces infections seraient pourtant evitables dans 20% des cas. Les morbi-mortalites importantes sont en partie associees au temps necessaire a l'examen microbiologique. En effet, les methodes conventionnelles d'identification de pathogenes et de resistances aux antibiotiques sont longues et laborieuses, le resultat etant obtenu plus de 2 a 5 jours apres le prelevement. Des techniques de diagnostic rapide existent, permettant de reduire ce delai a moins de 24h. Sont decrites dans cette these la PCR en temps reel, la technique de FISH, la spectrometrie de masse MALDI-TOF et finalement la PCR-ESI. Ces techniques presentent de nombreux avantages pour l'identification de pathogenes, mais doivent etre ameliorees afin de detecter un panel plus large de resistances aux antibiotiques."